简介：正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。
鲁斯蒂·沙克尔福特/乔·怀亚特/利奥·巴拉卡特/玛丽·德文/迪诺·安德拉德/乔伊·卡门/柯克·桑顿/Madison Brown/Dave B. Mitchell/汤姆·康特奈/乔恩·卡肖/萨拉·哈德兰/马特·卢卡斯/柯林·麦克法兰/谢里丹·史密斯/黛布拉·斯蒂芬森/妮娜·瓦迪娅/朱丽·沃特斯/杰克·怀特霍尔/雷·温斯顿/